《生死格斗OL》继承了DOA系列的操作方式。游戏的操作十分简单，通过“上下左右”移动以及对应的“脚、拳、投、防、返”即可与对手进行格斗。相应的，与单机一样，网络版除了提供键盘操作外，也提供手柄操作的功能。
入门简单，上手容易是《生死格斗OL》的操作特点。但是如果你想成为一名真正的格斗高手的话，则需要更熟悉自己使用的每个角色。在DOA的世界里，每个角色都对应自己的武术流派，并且有预先设定的各种出招表。玩家可以通过组合“上下左右”以及“脚、拳、投、防、返”8个键，使出各种各样的武技。如：绫音的“风斩龙舞”需要“↘X←C”四个键连用；而霞的“霜剑刹”则是向对手下段踢腿时，按“↙Z”键而实现的。
按键图示说明：
● 移动：
键盘上的“↑↓←→”和手柄上的“十字键”都可以用来控制角色的移动方向。
建议玩家把电脑键盘右侧的小数字键“8、4、6、2”设置为移动键。用这些数字表示的《生死格斗OL》出招表已约定俗成。比如“→→”通常就表示为“66”。
1表示：↙ 2表示：↓ 3表示：↘ 4表示：← 没有5这个说法哦！！！ 6表示：→ 7表示：↖ 8表示：↑ 9表示：↗
● 脚：：
键盘上的“C”和手柄上的“B”都可以让角色用“脚”攻击。
“PKH”是《生死格斗OL》的操作核心。而这里的“K”指的就是“脚”，如“→K”的意思就是“前腿”。
● 拳：：
键盘上的“X”和手柄上的“Y”都可以让角色用“拳”攻击。
“PKH”是《生死格斗OL》的操作核心。而这里的“P”指的就是“拳”，如“→P”的意思就是“前拳”。
● 防御：：
键盘上的“Z”和手柄上的“X”都可以让角色转为“防御”状态。。
“PKH”是《生死格斗OL》的操作核心。而这里的“H”指的就是“防御”，如“↓H”的意思就是“下防”。
● 投掷：：
键盘上的“V”和手柄上的“A”都可以让角色用“投掷”攻击。
“PKH” 是《生死格斗OL》的操作核心。玩家也可以同时按下“H”和“P”让角色用“投掷”攻击。如“↓HP”的意思就是“下投掷”。
